时间:2024-10-30 02:01:05
酶活性检测试剂盒使用方法
1. 试剂准备:取出所有试剂(包括检测样品),恢复至室温。 标准品工作液:取 15 μl p-nitrophenol 溶液(10 mM),用检测缓冲液稀释至 0.3 ml,终浓度为 0.5 mM。
2. 检测方案参考如下。标准品的用量分别为 2、4、8、16、24、32 和 40 μl,推荐设两个重复。样品通常 加 50 μl,如样品中的碱性磷酸酶活性过高,可减少样品用量或适当稀释后。为消除有色样本本身颜色 的影响,需设立样品对照孔,即加入样本,以检测缓冲液代替显色底物的对照。
3. 加完所有样品后,在微孔板震荡器上震荡混匀数十秒。37℃避光孵育 5 - 10 分钟。若待测样品中碱性 磷酸酶活性较低,可适当延长孵育时间至 30 分钟。
4. 每孔加入100 μl终止液终止反应。
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